Биология - Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация (MALDI) - Матрица

25 июня 2011


Оглавление:
1. Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация (MALDI)
2. Матрица
3. Механизм ионизации
4. Применение



Считается, что вещество, используемое в качестве матрицы, должно отвечать следующим основным требованиям:

1) обладать высоким коэффициентом экстинкции при длине волны лазерного излучения;
2) иметь способность к ионизации нейтральных молекул анализируемого вещества путем переноса заряда или заряженной частицы;
3) обладать хорошей растворимостью в растворителях, применяемых в процессе пробоподготовки;
4) быть химически инертным по отношению к анализируемому веществу;
5) иметь низкую летучесть и термическую устойчивость.

Стоит указать на селективность в выборе матричных соединений по отношению к классу анализируемых соединений. Во многом это определяется различной природой механизмов образования ионов анализируемого вещества. Как правило, доминирующим процессом в их образовании являются процессы вторичной ионизации, а именно ион-молекулярные взаимодействия между матричными ионами и молекулами анализируемого вещества. Иными словами, вторичная ионизация может происходить за счет таких процессов, как перенос протона, заряженной частицы в виде электрона, металл-катионов.

Например, существует широко распространенная группа кислотных матриц для анализа белков и пептидов: 2,5-дигидроксибензойная кислота, различные производные коричной кислот и т. д. Пептиды и белки, как правило, обладают высокими значениями сродства к протону от 900 кДж/моль и более. Эти значения превышают величины сродства к протону матричных соединений, в результате чего реакция переноса протона является экзотермической:

А + МН → М + АН, где А – молекула анализируемого вещества, М – матричная молекула.

Другой путь образования ионов происходит путем переноса электрона, конечным результатом которого является образование молекулярного радикал-катиона:

А + М → А + М.

Это наиболее эффективный способ образования положительных ионов для неполярных соединений с низкими значениями энергии ионизации.

Примеры МАЛДИ матриц
Название Английское название Растворители для матрицы Типы исследуемых веществ
2,5-Дигидроксибензойная кислота 2,5-Dihydroxybenzoic Acid Вода, этанол, метанол, ацетон, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидрофуран Пептиды, олигонулеотиды, полисахариды, синтетические полимеры
2--бензойная кислота 2--benzoic acid Диоксан, ацетон, тетрагидрофуран, диметилформамид Пептиды, белки, синтетические полимеры
α-Циано-4-Гидроксикоричная кислота α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid Ацетон, водн. ацетонитрил, ТГФ, ДМФА, этанол Пептиды, синтетические полимеры
Синапиновая кислота Sinapic Aсid ТГФ, ДМФА Пептиды, белки, липиды
Феруловая кислота Ferulic Aсid ТГФ, ДМФА Пептиды, белки
1,8,9-Антрацентриол 1,8,9-anthracentriol ТГФ, ДМФА, толуол, хлороформ, хлорбензол Синтетические полимеры, липиды


Просмотров: 10693


<<< Метод Бредфорда