Биология - Эндонуклеазы рестрикции
09 февраля 2011Оглавление:
1. Эндонуклеазы рестрикции
2. Изошизомеры
3. Значение
Эндонуклеазы рестрикции, рестриктазы — группа ферментов, относящихся к классу гидролаз, катализирующих реакцию гидролиза нуклеиновых кислот.
В отличие от экзонуклеаз, рестриктазы расщепляют нуклеиновые кислоты не с конца молекулы, а в середине. При этом каждая рестриктаза узнаёт определённый участок ДНК длиной от четырёх пар нуклеотидов и расщепляет нуклеотидную цепь внутри участка узнавания или вне его.
Защита бактериального генома от собственной рестриктазы осуществляется с помощью метилирования нуклеотидных остатков аденина и цитозина.
Классификация
Выделяют три основных типа ферментов рестрикции, сайты узнавания для которых могут быть симметричными и несимметричными:
- Рестриктазы первого типа узнают определённую последовательность нуклеотидов и разрезают двухцепочную молекулу ДНК неподалёку от этой последовательности в произвольной точке и само место разреза не строго специально.
- Рестриктазы второго типа узнают определённую последовательность и разрезают двойную спираль ДНК в определённой фиксированной точке внутри этой последовательности. Рестриктазы этого типа узнают палиндромальные последовательности, которые обладают центральной осью и считываются одинаково в обе стороны от оси симметрии.
- Рестриктазы третьего промежуточного типа узнают нужную последовательность и разрезают двухцепочную молекулу ДНК, отступив определённое число нуклеотидных пар от её конца. При этом образуются фрагменты ДНК либо с ровными концами, либо с выступающими 5'- или 3'-концами. Эти рестриктазы узнают асимметричные сайты.
К 2007 году выделено более трех тысяч эндонуклеаз рестрикции. Более шестисот рестриктаз доступны в виде коммерческих препаратов и повседневно используются в лабораториях для модификации ДНК и решения генно-инженерных задач.
Просмотров: 11166
|
|